-->

Cara Membuat Larutan Stok

Dalam membuat medium kultur jaringan, biasanya menimbang setiap bahan kimia yang terdapat pada resep medium dasar. Langkah ini dianggap kurang praktis karena membutuhkan waktu lama dan mengurangi ketepatan. Kadang timbangan yang akan digunakan untuk menimbang bahan kimia dalam jumlah kecil tidak tersedia. Kendala ini dapat diatasi dengan cara membuat larutan stok terlebih dahulu.

Larutan stok dapat digunakan untuk 40, 50, bahkan 100 liter medium. Larutan stok dalam bentuk cairan dapat disimpan di dalam almari es. Pembuatan larutan stok harus dilakukan dengan teliti, karena larutan stok yang terlalu pekat akan mengalami pengendapan di dalam almari es. Jika terjadi pengendapan, maka sebelum digunakan larutan stok ini harus dipanaskan terlebih dahulu. Larutan stok yang sudah terkontaminasi tidak boleh digunakan lagi. Sebaiknya dalam membuat larutan stok ini jumlahnya tidak terlalu banyak dan faktor kebersihan tempat penyimpanan harus benar-benar dijaga agar tidak mudah terkontaminasi.

Cara Pembuatan Larutan Stok

Cara pembuatan larutan stok yang akan diuraikan pada artikel ini yaitu pembuatan larutan stok pada medium MS (Murashige dan Skoog ). Medium MS ini yang biasanya dibuat di laboratorium kultur jaringan karena medium MS dapat digunakan hampir untuk semua macam tanaman.

Di bawah ini akan dibuat larutan stok dengan memperbesar konsentrasi, tujuannya yaitu supaya dalam penimbangan bahan kimia tidak mengalami kesulitan karena bahan kimia yang perlu ditimbang sangat kecil.

A. Larutan Stok A, 1 Liter ( 50 x konsentrasi )

  • Timbang Amonium Nitrat ( NH4NO3 ) 83,50 gram, masukkan ke dalam gelas piala dan tambahkan aquadest kira-kira700 ml. Aduk sampai larut.
  • Pindahkan larutan tersebut ke dalam labu takar 1 liter dan tambahkan aquadest sampai tanda batas. Gojog hingga homogen.
  • Larutan yang sudah jadi dipindahkan ke dalam botol reagen, tutup rapat dan beri label Stok A.
  • Larutan ini mengandung 83,50 mg/ml NH4NO3 
  • Untuk membuat 1 liter medium MS diperlukan 20 ml stok A.

B. Larutan Stok B, 1 Liter ( 50 x konsentrasi )

  • Timbang Kalium Nitrat ( KNO3 ) 95 gram, masukkan ke dalam gelas piala dan larutkan dengan aquadest kira-kira 700 ml, aduk hingga larut sempurna.
  • Pindahkan ke dalam labu takar dan tambah aquadest sampai tanda batas. Gojog hingga homogen.
  • Larutan yang sudah jadi dipindahkan ke dalam botol reagen dan beri label Stok B.
  • Larutan ini mengandung 95 mg/ml  KNO3
  • Untuk membuat 1 liter medium MS diperlukan 20 ml stok B.

C. Larutan Stok C, 1 Liter ( 100 x konsentrasi )

  • Timbang CaCl2.2H2O 44 gram, kemudian larutkan dengan aquadest 700 ml dalam gelas piala. Aduk hingga larut.
  • Tuang larutan tersebut ke dalam labu takar dan tambahkan aquadest sampai tanda batas.
  • Pindahkan larutan ke dalam botol reagen dan beri label Stok C.
  • Larutan ini mengandung 44mg/ml CaCl2.2H2O
  • Untuk membuat 1 liter medium MS diperlukan 10 ml stok C. 

D. Larutan Stok D, 1 Liter ( 100 x konsentrasi )

  • Timbang MgSO4.7 H2O 37 gram dan KH2PO4 17 gram, larutkan secara terpisah dengan masing-masing 350 ml aquadest.
  • Setelah larut, tuang kedua larutan tersebut ke dalam labu takar 1 liter dan tambahkan aquadest sampai tanda batas. Gojog hingga homogen.
  • Pindahkan larutan yang sudah jadi ke dalam botol reagen, tutup rapat dan beri label Stok D.
  • Larutan ini mengandung 37 mg/ml MgSO4.H2O dan 17 mg/ml KH2PO4.
  • Untuk membuat 1 liter medium MS diperlukan 10 ml stok D.

E. Larutan Stok E, 1 Liter ( 200 x konsentrasi )

  • Timbang FeSO4.7H2O 5,57 gram dan Na2EDTA 7,45 gram. larutkan secara terpisah.
  • Larutkan FeSO4.7H2O dengan aquadest kira-kira 100 ml, tambahkan dengan 1-2 tetes H2SO4 pekat.
  • Larutkan Na2EDTA dengan aquadest 100 ml dan dipanaskan pada suhu 40 - 60 °C selama beberapa menit, kemudian tambah larutan FeSO4.7H2O. Aduk hingga larut sempurna. Biarkan dingin.
  • Tuang larutan tersebut ke dalam labu takar 1 liter, tambahkan aquadest sampai tanda batas.
  • Pindahkan ke dalam botol reagen dan beri label Stok E.
  • Larutan stok ini disimpan dalam keadaan kedap cahaya dengan cara membungkus botol dengan aluminium foil karena cahaya dapat merusak Fe.
  • Larutan ini mengandung 5,57 mg/ml FeSO4.7H2O dan 7,45 mg/ml Na2EDTA.
  • Untuk membuat 1 liter medium MS dibutuhkan 5 ml stok E.

F. Larutan Stok F, 1 Liter ( 200 x konsentrasi )

  • Timbang MnSO4.H2O 3,380 gram. ZnSO4.7H2O 1,720 gram. H3BO3 1,240 gram. KI 0,165 gram. CuSO4.5H2O 0,005 gram. Na2MO.2H2O 0,05 gram. COCl2.2H2O 0,005 gram.
  • Masukkan bahan satu persatu sampai larut ke dalam gelas piala yang berisi 700 ml aquadest. Aduk hingga larut.
  • Tuang larutan ke dalam labu takar dan tambahkan aquadest sampai tanda batas. Gojog hingga homogen.
  • Pindahkan larutan ke dalam botol reagen, tutup rapat, dan beri label Stok F.
  • Untuk membuat 1 liter medium MS dibutuhkan 5 ml stok F.

G. Larutan Stok G ( Vitamin ), 100 ml ( 1000 x konsentrasi )

  • Timbang Thiamin-HCl 0,01 gram. Nicotinic Acid 0,05 gram. Pyridoxin-HCl 0,05 gram. Glycine 0,2 gram.
  • Masukkan semua bahan ke dalam gelas piala dan tambahkan aquadest kira-kira 50 ml. Aduk hingga larut.
  • Tuang larutan ke dalam labu takar 100 ml dan tambah aquadest sampai tanda batas.
  • Pindahkan ke dalam botol reagen dan beri label Stok G.
  • Untuk membuat 1 liter medium MS dibutuhkan 1 ml stok F.

Kebutuhan larutan stok untuk membuat media MS dalam 1 liter bisa dilihat pada tabel berikut :

























REFERENSI

Daisy P. Sriyanti Hendaryono dan Ari Wijayani, 1994.Teknik Kultur Jaringan : Pengenalan dan Petunjuk Perbanyakan Tanaman Secara Vegetatif Modern. Kanisius. Yogyakarta.

Membuat Larutan Amonium Nitrat (NH4NO3) 1 M

Amonium Nitrat adalah senyawa kimia berbentuk padatan kristal putih dan sangat larut dalam air. Amonium nitrat merupakan garam nitrat dari kation amonium. Rumus kimia amonium nitrat yaitu NH4NO3. 

Senyawa ini utamanya digunakan dalam pertanian sebagai pupuk kaya nitrogen. Selain itu senyawa ini juga digunakan sebagai komponen campuran peledak dalam industri pertambangan dan kontruksi sipil.

Amonium nitrat memiliki berat molekul 80,043 gr/mol. Kelarutan dalam air :

  • 118 g/100 ml (0 °C)
  • 150 g/100 ml (20 °C)
  • 297 g/100 ml (40 °C)
  • 410 g/100 ml (60 °C)
  • 576 g/100 ml (80 °C)
  • 1024 g/100 ml (100 °C)
Berdasarkan simbol piktogram yang tertera pada botol kemasan, amonium nitrat ini bersifat mudah meledak. Jauhkan dari panas/ percikan api/ api terbuka/ permukaan panas.

Membuat Larutan Amonium Nitrat (NH4NO3) 1 M, 500 ml

1. Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan

Alat :
  • Timbangan analitik
  • Labu takar 500 ml
  • Gelas beker/piala 200 ml
  • Batang pengaduk
Bahan :
  • Amonium Nitrat ( NH4NO3)
  • Aquadest
2. Menghitung kebutuhan Amonium Nitrat untuk membuat 1 M sebanyak 500 ml

Dengan menggunakan rumus molaritas, yaitu :
M = (gr/Mr ) x ( 1000/V )
1 M = (gr/80,043) x ( 1000/500)
1 M= (gr/80,043) x 2
gr = (80,043 x 1 ) / 2
gr = 40,02 gram

Jadi NH4NO3 yang dibutuhkan untuk membuat amonium nitrat 1 M yaitu 40,02 gram.

Catatan : Amonium Nitrat 1 M ini setara dengan 1 N

3. Langkah Membuat Amonium Nitrat 1 M yaitu :
  • Timbang Amonium Nitrat sebanyak 40,02 gram. Masukkan ke dalam gelas piala kemudian larutkan dengan aquadest 150 ml. Aduk hingga larut sempurna.
  • Pindahkan larutan ke dalam labu takar 500 ml dan tambah aquadest sampai tanda batas. Gojog hingga homogen.
  • Larutan Amonium Nitrat 0,1 M siap digunakan.

REFERENSI

https://id.wikipedia.org/wiki/Amonium_nitrat

Mulyono, H. A. M. (2006). Membuat Reagen Kimia di Laboratorium. Bumi Aksara. Jakarta

Cara Membuat Larutan Kupri Sulfat ( CuSO4.5H2O ) 0.5 M

Kupri Sulfat Pentahidrat / Copper (II) Sulfate Pentahydrate/ Tembaga (II) Sulfat Pentahidrat merupakan senyawa kimia berbentuk serbuk dengan warna biru terang. Rumus kimia Kupri Sulfat Pentahidrat yaitu CuSO4. 5H2O.


Rumus molekul CuSO4.5H2O yaitu 249,70 gr/mol, densitas 2,284 gr/cm3, kelarutan dalam air 316 g/L pada suhu 0 °C  dan 2033 g/L pada suhu 100 °C. Untuk kelarutan dalam metanol 10,4 gr/L pada suhu 18 °C dan tidak larut dalam etanol.

Untuk penggunaan di laboratorium kupri (II) sulfat digunakan sebagai reagen analisis untuk mengetes gula reduksi.

Kupri (II) sulfat pentahidrat bersifat mengiritasi. Biasanya manusia terpapar kupri sulfat melalui kontak mata atau kulit, termasuk juga dengan menghirup serbuk atau debunya. Asal tidak terkena paparan tinggi, kupri sulfat tidak terlalu beracun. Kupri sulfat akan menjadi racun dalam tubuh manusia apabila terkena paparan 11mg/kg. Karena kupri sulfat akan menyebabkan iritasi pada sistem pencernaan, apabila tertelan akan langsung muntah. Setelah 1-12 gram kupri sulfat tertelan, tanda-tanda racun akan muncul seperti rasa terbakar di dada, mual, diare, muntah, sakit kepala, dan akan menyebabkan kulit menjadi kuning. Selain itu, keracunan kupri sulfat juga merusak otak, hati, dan ginjal.

Membuat Larutan Kupri (II) Sulfat Pentahidrat 0,5 M ( 1N ), 500 ml

1. Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan

Alat : 
  • Timbangan analitik
  • Gelas piala 50 ml dan 200 ml
  • Labu takar 500 ml
  • Pengaduk kaca
  • Pipet ukur 5 ml
  • Botol semprot
Bahan :
  • CuSO4.5H2O
  • Asam sulfat 97% ( pekat )
  • Aquadest
2. Menghitung kebutuhan CuSO4.5H2O untuk membuat 0.5 M ( 1 N ) yaitu,

>> Dengan menggunakan rumus molaritas apabila diketahui molaritasnya
M = ( gr / 249.70 ) x ( 1000/500 ml)
0.5 = ( gr / 249.70 ) x 2
gr = ( 249.70 x 0.5 ) / 2
gr = 62.4 gram

Jadi CuSO4.5H2O yang harus ditimbang untuk membuat 0.5 M, 500 ml yaitu 62.4 gram.

>> Dengan menggunakan rumus normalitas apabila diketahui normalitasnya
N = (gr x 2 ) / ( 249.70 x 0.5 L )
1 = ( gr x 2 ) / 124.85
gr = ( 124.85 x 1 ) / 2
gr = 62.4 gram
Jadi CuSO4.5H2O yang harus ditimbang untuk membuat 1 N, 500 ml yaitu 62.4 gram.

3. Cara membuat larutan CuSO4.5H2O 0.5 M ( 1 N ) yaitu :
  • Timbang 62.4 gram CuSO4.5H2O dalam gelas piala 50 ml.
  • Pipet Asam sulfat ( H2SO4) pekat 2.5 ml dan larutkan ke dalam gelas piala yang berisi aquadest 100 ml.
  • Kemudian larutkan CuSO4.5H2O ke dalam larutan yang berisi asam sulfat tadi. Aduk hingga larut sempurna.
  • Masukkan larutan ke dalam labu takar 500 ml dan tambahkan aquadest sampai tanda batas. Gojog hingga homogen.
  • Pindahkan ke dalam botol reagen dan beri label.
  • Larutan CuSO4.5H2O 0.5 M ( 1 N ) siap digunakan.

REFERENSI

https://id.wikipedia.org/wiki/Tembaga(II)_sulfat

Mulyono, H. A. M. (2006). Membuat Reagen Kimia di Laboratorium. Bumi Aksara. Jakarta